1、奶牛发情观察和鉴定
发情观察是奶牛人工授精技术主要环节之一，是适时输精的基础和依据。发情鉴定方法有行为及生殖道观察和计步器统计等方法。 母牛“静立”接受它牛爬跨是确定母牛发情的主要特征，结合外阴肿胀、阴道粘膜颜色及粘液性状进行确认。连续观察以第一次稳定接收爬跨时间来推算最佳输精时间。

母牛发情确认主要特征见下表

	骚动期（发情前期）	静立强拉丝期（发情期）	恢复期（发情后期）
爬跨	爬跨其他牛	静立、接受爬跨、有时也爬跨其他牛	拒绝其他牛爬跨、有时也爬跨其他牛
行为	敏感、哞叫、躁动、回首、尾随、多站立或走动	尾随、舔他牛、食欲减退、不安	慢慢恢复常态
粘液	量少、拉不起来	量多、前期拉起来挂不住、后期强拉丝、丝可成Y状	粘液呈胶状
外阴颜色	浅红色（暗红）	深红色（潮红）	粉红色（苍白）
外阴肿胀度	稍有肿胀	明显肿胀	外阴收缩有皱褶
尾根及肛门	抬尾巴发僵硬	尾根发软向一侧摆，肛门有节奏的收缩	无发情表现
持续时间	2-10小时	12-18小时	4-12小时
卵泡发育情况

2、发情母牛的保定及直肠检查
    输精前将发情母牛在保定架或牛颈枷等固定场所保定，并进行直肠检查，判断其子宫、卵巢和卵泡发育情况是否正常。如发现子宫结构异常、子宫积水、卵泡囊肿、卵泡未发育等异常情况不适宜进行人工输精。
3、发情母牛的最佳输精时间和部位
    母牛发情以稳定接受爬跨为主要判断症候，连续观察从第一次稳定爬跨计算16—20小时为最佳输精时间。普通冻精的输精部位为子宫体，性控冻精的输精部位必须是子宫深部或卵巢发育侧子宫角，只有这样才能达到较高的受胎率。
4、冻精的提取及解冻、装枪
从液氮罐中提取冻精时，提桶在白线以下（离罐口以下5厘米）用长镊子夹取所需冻精细管，快速放入水温37℃解冻杯中解冻10秒即可。解冻好的细管用干净的卫生纸擦去表面的水滴，从封口处1厘米整齐剪断，装入事先准备好的输精枪内。普通冻精和性控冻精的解冻和装枪方法及要求相同。

5、输精操作
    通过左手直肠把握将输精枪送到子宫内，具体部位普通冻精为子宫体，性控冻精为子宫深部前1/3大弯处或卵泡发育侧子宫角。右手平稳地推动输精枪内芯把精液推入子宫内相应位置，抽出输精枪。在操作过程中要做好输精枪和外阴部消毒，必须使用软、硬外套，冬春气温低的季节应特别注意输精枪保温。